タカハシ　カンジ   TAKAHASHI KANJI   髙橋　寛二    所属   関西医科大学  眼科学講座    職種   非常勤講師
言語種別	日本語
発表タイトル	小胞体ストレスとtight junction
会議名	第15回 眼科分子生物学研究会
学会区分	研究会
発表者・共同発表者	◎吉川匡宣, 緒方奈保子, 髙橋寛二
発表年月日	2011/01
開催地 （都市, 国名）	宮崎
概要	【目的】ＥＲストレスは炎症性サイトカインの発現を増強し、糖尿病網膜症や加齢黄斑変性発生の一因であるとされている。網膜色素上皮（ＲＰＥ）の機能は糖尿病網膜症や加齢黄斑変性の病態に関与する。そこでＲＰＥにＥＲストレスを負荷した時のtight junctionの変化を検討した。 【方法】ヒト網膜色素上皮細胞（ARPE19）にTunicamycin（TM：1μg/ml）、Thapsigargin（TG：1μM）をそれぞれ添加した。6、12、24、48時間後にGRP78/BipおよびC/EBP-homologous protein(CHOP)、zonula occludens(ZO)-1、occludin、claudin-1、さらに血管内皮増殖因子（VEGF）の発現をreal time PCRで検討した。また４８時間後にwestern blotおよび免疫染色を用いて、ZO-1、occludin、claudin-1の発現を検討した。さらにＥＲストレス負荷後０日から９日まで1日毎に経上皮電気抵抗測定（Transepithelial electorical resistance：TER）を行い透過性の変化も検討した。 【結果】real time PCRで６時間後よりGRP78/BipおよびCHOPの発現が増加、２４時間後よりVEGFの発現が増加した。real time PCR、western blot、免疫染色いずれにおいてもZO-1、occludin、claudin-1の発現が増加した。TERはコントロールと比較して２日目に抵抗値が上昇し、９日目には低下した。 【結論】ＥＲストレスによってＲＰＥのtight junctionに変化が生じていた。ＥＲストレスでＲＰＥの機能が変化し、糖尿病網膜症や加齢黄斑変性の病態に関与することが推測された。